Говежди туберкулоза Антитяло ELISA комплект

Спецификация

BTB AB ELISA

Предвидена употреба: Комплектът за откриване на антитяло на говежди туберкулоза ELISA е за определяне на говежди туберкулоза

Антитяло в серума на говедата на Mycobacterium bovis in vitro.

Тестът се използва за оценка на инфекцията на говежди туберкулоза. MPB 70- MPB83 chimera рекомбинант беше приложен в този тест.

Образец: Серум

Необходими материали, но не са предвидени:

Пречистена вода

Пипетор

96- четец на микроплаки на кладенеца (450nm)

Таймер

Центрофуга (4000 об / мин)

Пералня

Фурна (37 градуса)

Тестови процедури и интерпретация

Стъпка 1Процедура за изпитване

1.1 Подготовка на разтвора за измиване

Wконцентрация на Оркинг wтечност за пепел:Преди употреба разтворът за измиване трябва да се възстанови до стайна температура (20-25 градус) и да се разклаща равномерно, за да го направи еднакъв. След това разредете 20 пъти по -голям разтвор на концентрирана промивка с пречистена вода (например 5ml концентриран разтвор за промиване се добавя към 95ml пречистена вода), смесете добре и разредената течност за промиване може да се съхранява в 2-8 градус в продължение на 7 дни.

1.2 Подготовка на пробата

① Цяла животинска кръв беше взета, центрофугирана при 4000 об / мин за 10 минути и се събира супернатант. Серумът също може да бъде коагулиран естествено без хемолиза.

② Разредете серумната проба 1: 100 (добавете 2UL серумна проба към разредител от 198UL пробата) и разбъркайте добре.

Забележка: Не е необходимо да се разрежда отрицателните и положителните контроли.

1.3 ензимен конюгат подготовка

Разредете ензима конюгат 1: 200 (добавете 5UL ензимен конюгат (x100) до 995UL проба разредител) и разбъркайте добре.

1.4 Процедура за изпитване

① Вземете микроплака на етикета на ензима (според броя на пробите може да се разглоби и използва няколко пъти), добавете 100UL от разредения серум към микроплака на етикета на ензима, задайте по две ямки за отрицателни и положителни проби и добавете 100Ul всяка за отрицателни и положителни контроли съответно към реакцията. Нежно разклатете пробата в кладенеца, като използвате филма за уплътняваща плоча за покриване на плочата и инкубирайте на 37 градуса за 30 минути.

Отворете филма на уплътняващата плоча, отърсете разтвора в плаката добре, добавете 300 ul работна концентрация промивна течност към всяка ямка и след това изхвърлете течността в кладенеца. Повторете горните стъпки 5 пъти и накрая изсушете върху чиста абсорбираща хартия.

③Dd 100 ul ензимен конюгат към всяка ямка, покрийте плочата и инкубирайте на 37 градуса за 45 минути.

Open Настанете филма за уплътняваща плоча, разклатете разтвора в кладенецът на плочата, добавете 300 ul работна концентрация течност за промиване на течност към всяка ямка и след това изхвърлете течността в кладенеца. Повторете горните стъпки 5 пъти и накрая изсушете върху чиста абсорбираща хартия.

⑤dd 100 ul разтвор на субстрата към всяка ямка, покрийте плочата и инкубирайте за 10 минути на 37 градуса от светлината.

⑥Дод 50 µl Стоп разтвор на всяка ямка и определете резултата в рамките на 5 минути.

Стъпка 2 Тълкуване на резултатите

Стойността OD450 на всеки ямка беше прочетена на 96- четец на микроплаки за кладенеца.

2.1 Валидиране

Средната стойност на OD450NM на отрицателното управление беше<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Метод на изчисление

За всяка проба изчислете S/P, както следва, като използвате коригираната проба и контролните стойности:

2.3 Тълкуване на резултатите

Когато s/p<0.25, it is judged as negative.

Когато S/P е по -голям или равен на 0. 30, той се оценява като положителен.

Когато 0. 25 по -малко или равни на s/p<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Популярни тагове: говежди туберкулоза Антитела ELISA KIT, Китай До доставчици на комплект ELISA KIT, производители, фабрика, фабрика