Комплект за борба с крак и уста вирус-о антитяло ELISA

Спецификация

FMDV-O AB ELISA

Предвидена употреба: Вирусът на болестта на краката и устата

Комплектът за откриване на ELISA на антитела е за определяне на антитялото на краката и устата в серума на говедата in vitro. Тестът се използва за оценка на статуса на имунитета на болестта на краката и устата на фермата.

Образец: Серум

Необходими материали, но не са предвидени:

Пречистена вода

Пипетор

96- четец на микроплаки на кладенеца (450nm)

Таймер

Центрофуга (4000 об / мин)

Пералня

Фурна (37 градуса)

Тестови процедури и интерпретация

Стъпка 1 Процедура за тестване

1.1 Подготовка на разтвора за измиване

Wконцентрация на Оркинг wтечност за пепел:Преди употреба разтворът за измиване трябва да се възстанови до стайна температура (20-25 градус) и да се разклаща равномерно, за да го направи еднакъв. След това разредете 20 пъти по -голям разтвор на концентрирана промивка с пречистена вода (например 5ml концентриран разтвор за промиване се добавя към 95ml пречистена вода), смесете добре и разредената течност за промиване може да се съхранява в 2-8 градус в продължение на 7 дни.

1.2 Подготовка на пробата

① Цяла животинска кръв беше взета, центрофугирана при 4000 об / мин за 10 минути и се събира супернатант. Серумът също може да бъде коагулиран естествено без хемолиза.

② Разредете серумната проба 1:25 (добавете 5UL серумна проба към 120UL проба разредител) и разбъркайте старателно.

Забележка: Отрицателните и положителните контроли също се нуждаят от разреждане.

1.3 ензимен конюгат подготовка

Разредете конюгата на ензима 1:90 (добавете 5UL ензим конюгат (x100) до 445UL пробата на пробата) и разбъркайте добре.

1.4 Процедура за изпитване

① Вземете микроплака на етикета на ензима (според броя на пробите може да се разглоби и използва няколко пъти), добавете 100UL от разредения серум към микроплака на етикета на ензима, задайте по две ямки за отрицателни и положителни проби и добавете 100Ul всяка за отрицателни и положителни контроли съответно към реакцията. Нежно разклатете пробата в кладенеца, като използвате филма за уплътняваща плоча за покриване на плочата и инкубирайте на 37 градуса за 30 минути.

Отворете филма на уплътняващата плоча, отърсете разтвора в плаката добре, добавете 300 ul работна концентрация промивна течност към всяка ямка и след това изхвърлете течността в кладенеца. Повторете горните стъпки 5 пъти и накрая изсушете върху чиста абсорбираща хартия.

③Dd 100 ul ензимен конюгат към всяка ямка, покрийте плочата и инкубирайте на 37 градуса за 45 минути.

Open Настанете филма за уплътняваща плоча, разклатете разтвора в кладенецът на плочата, добавете 300 ul работна концентрация течност за промиване на течност към всяка ямка и след това изхвърлете течността в кладенеца. Повторете горните стъпки 5 пъти и накрая изсушете върху чиста абсорбираща хартия.

⑤dd 100 ul разтвор на субстрата към всяка ямка, покрийте плочата и инкубирайте за 10 минути на 37 градуса от светлината.

⑥Дод 50 µl Стоп разтвор на всяка ямка и определете резултата в рамките на 5 минути.

Стъпка 2 Тълкуване на резултатите

Стойността OD450 на всеки ямка беше прочетена на 96- четец на микроплаки за кладенеца.

2.1 Валидиране

Средната стойност на OD450NM на отрицателното управление беше<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Метод на изчисление

За всяка проба изчислете S/P, както следва, като използвате коригираната проба и контролните стойности:

2.3 Тълкуване на резултатите

Когато s/p<0.15, it is judged as negative.

Когато S/P е по -голям или равен на 0. 25, той се оценява като положителен.

Когато 0. 15 по -малко или равни на s/p<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Популярни тагове: Комплект за борба с крак и уста вирус-о антитяло ELISA KIT, Китай за болест на краката и устата Вирус-О Антитяло ELISA комплект доставчици, производители, фабрика